Codice insegnamento

4S02696

Crediti

4

Coordinatore

Non ancora assegnato

Lingua di erogazione

Italiano

Settore Scientifico Disciplinare (SSD)

BIO/10 - BIOCHIMICA

Corsi Singoli

Autorizzato

Moodle Seminari 0

Per visualizzare la struttura dell’insegnamento a cui questo modulo appartiene, consultare:  organizzazione dell'insegnamento

L'insegnamento è organizzato come segue:

Programma

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UL: teoria
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Purificazione delle proteine
Proprietà ioniche di amminoacidi e proteine. Punto isoelettrico. Preparazione del campione. Metodi di rottura delle cellule e produzione degli estratti grezzi iniziali. Metodi di solubilizzazione delle proteine. Tamponi salini. Tecniche di frazionamento e precipitazione. Filtrazione, dialisi, concentrazione del campione.
Tecniche spettroscopiche.
Proprietà della radiazione elettromagnetica. Interazione luce-materia. Stati e processi coinvolti nei fenomeni di assorbimento, emissione e decadimento. Spettroscopia di assorbimento nell’ultravioletto e nel visibile. Aspetti qualitativi e quantitativi dell'assorbimento della luce. Metodi colorimetrici e spettroscopici applicati alla determinazione della concentrazione proteica. Spettrofotometri. Spettroscopia di emissione e fluorescenza. Fluorofori intrinseci ed estrinseci. Proteine fluorescenti (Green fluorescent protein) Spettrofluorimetri. Fluorescence resonance energy transfer (FRET). Dicroismo circolare.
Tecniche cromatografiche.
Principi della cromatografia. Il cromatogramma. Parametri che determinano le prestazioni cromatografiche. Equazione di Van Deemter. Cromatografia su colonna: scambio ionico, esclusione molecolare, affinità, interazione idrofobica e loro applicazioni. Purificazione proteine di fusione con
Tecniche elettroforetiche.
Principi generali e mobilità elettroforetica. Materiali di supporto. Elettroforesi di acidi nucleici. Elettroforesi di proteine. SDS PAGE. Elettroforesi in condizioni native. Colorazione delle proteine su gel. Blotting delle proteine (western blotting). Cenni di : Isoelettrofocalizzazione. Elettroforesi capillare. Gel elettroforesi bidimensionale.
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UL: laboratorio
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1) Preparazione di buffer per lo studio di molecole proteiche
2) Metodi colorimetrici e spettroscopici per la determinazione della concentrazione proteica.
3) Determinazione dei parametri cinetici della fosfatasi acida.
4) Determinazione del coefficiente di estinzione molare del NADPH.
5) Metodi elettroforetici: Gel di poliacrilamide e SDS gel elettroforesi di proteine
6) WESTRN-BLOT
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UL: laboratorio
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1) Metodi colorimetrici e spettroscopici per la determinazione della concentrazione proteica.
2) Determinazione dei parametri cinetici della fosfatasi acida.
3) Determinazione del coefficiente di estinzione molare del NADPH.
4) Cromatografia ad esclusione molecolare per lo studio del peso molecolare di una proteina incognita.
5) Metodi elettroforetici: Gel di poliacrilamide e SDS gel elettroforesi di proteine
6) WESTRN-BLOT

Modalità didattiche

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UL: teoria
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ll corso è strutturato in lezioni teoriche frontali e esercitazioni guidate nel laboratorio di biochimica. In particolare sono previste 40 ore complessive di didattica (4 CFU) di cui 16 ore di lezione e 24 ore di esercitazioni pratiche di laboratorio. Le lezioni si svolgono settimanalmente in aula e l’esposizione avviene mediante l’utilizzo di diapositive su power-point
Per i laboratori gli studenti vengono divisi in piccoli gruppi.
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UL: laboratorio
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Esperienze pratiche di laboratorio, con piccoli gruppi di studenti
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UL: laboratorio
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Esperienze di laboratorio a piccoli gruppi

Modalità di verifica dell'apprendimento

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UL: teoria
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L’esame finale (scritto) verterà su tutti gli argomenti del programma. Lo studente dovrà dimostrare di aver compreso e di essere in grado di utilizzare i concetti fondamentali di ogni argomento.
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UL: laboratorio
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Gli argomenti trattati durante i laboratori potranno essere oggetto di esame per il corso "Biochimica e Biochimica analitica".
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UL: laboratorio
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Gli argomenti trattati durante i laboratori potranno essere oggetto di esame per il corso "Biochimica e Biochimica analitica".

Criteri di valutazione

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UL: teoria
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L'esame scritto consiste di 11 domande a risposta multipla e/o aperte, ad ogni risposta corretta vengono assegnati 3 punti
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UL: laboratorio
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Verrà valutata la capacità dello studente di eseguire calcoli di base per la preparazione di soluzioni usate in laboratorio o per il calcolo di diluizioni. Inoltre domande aperte o a scelta multipla verranno chieste per verificare l'apprendimento.
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UL: laboratorio
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L’obiettivo della prova d’esame consiste nel verificare il livello di conoscenza ed approfondimento degli argomenti del programma del corso e la capacità di ragionamento sviluppata dallo studente.

Lingua dell'esame

------------------------ UL: teoria ------------------------ Italiano ------------------------ UL: laboratorio ------------------------ Italiano ------------------------ UL: laboratorio ------------------------ Italiano